生物顯微鏡和體視顯微鏡的使用

生物顯微鏡和體視顯微鏡的使用對于一個生物醫學工作者來說，電子顯微鏡是理論和臨床研究中不可缺少的工具。為了充分發揮其功效，我們必須學會正確使用它。除了掌握必要的電子顯微鏡基礎知識外，我們在工作中還應注意以下幾個方面。

1.準確確保透射電子顯微鏡各部分的對中

所謂的對中標準是為了實現:

(1)放大率改變時，視場中心不會丟失；

(2)改變試樣上的照明條件時，照明光束不會失去均勻性或偏離中心；

(3)對焦圖像時，不會偏離J的中心；

(4)當功能開關從一種模式切換到另一種模式時，生物顯微鏡和體視顯微鏡使用的試樣上的照明不會受到影響。要保證以上幾點，首先是電子顯微鏡本身的設計和制造要過硬。生物顯微鏡和體視顯微鏡的使用。其次，對于用戶來說，每次使用前必須將儀器調整到良好的狀態。

電子顯微鏡的校準包括:

(1)電子槍、聚光器、中間鏡、投影鏡等。相對于物鏡居中。由于電子顯微鏡的光軸在出廠時與電子顯微鏡的機械軸完全重合，所以物鏡可以作為對準的參考標準。

(2)電子顯微鏡各級配備的電子束偏轉系統應以軸為中心。

(3)各級活動光闌(包括聚光鏡、物鏡和中間鏡的光闌)也要居中。誠然，生物顯微鏡和體視顯微鏡的使用通常在每個實驗室都有專門的技術人員負責電子顯微鏡的基本調整，以提供必要的工作條件。但有些對齊條件在使用過程中難免會被破壞或改變，所以研究人員一定要能及時發現問題，學會隨時調整。

2.特別注意各個級別的散光透鏡尤其是物鏡

用低倍鏡檢查熒光屏上的光點時，顯微鏡會發現光點偏離圓圈。這說明聚光器存在像散，會導致亮度損失，形成不對稱的照明孔徑角，影響成像質量。所以在對中的同時要消除聚光鏡的散光。

物鏡的散光更重要。由于散光的原因，尼康顯微鏡不僅不能獲得清晰的圖像，而且在高放大倍數的圖像中往往會有一些細節偽影。消除像散的有效方法是在試樣支撐膜上找到一個小孔，先將物鏡調整到少量散焦，然后用生物顯微鏡和體視顯微鏡調整像散裝置，使膜孔周圍的黑邊各處寬度均勻。然后，物鏡被調整到直接聚焦。從事高分辨率工作的科技工作者必須學會自行消除散光。

3.學會選擇正確的工作參與和工作模式

在電子顯微鏡中有許多參數可供選擇，例如電子槍的加速電壓、由聚光器確定的基本束斑尺寸、每級可移動光闌的孔徑透鏡，等等。電子顯微鏡學家可以根據實驗試樣的厚度、生物顯微鏡和體視顯微鏡的化學成分、原始對比度特性和對振幅的抵抗程度，自由選擇上述物理量。

電子顯微鏡本身也可以用于不同的工作模式，如常規成像、低功率采樣、選擇性成像、選擇性衍射和高分辨率衍射。如果增加X射線能譜儀、生物顯微鏡和體視顯微鏡等附件，會有更多的工作模式。生物顯微鏡和體視顯微鏡的用戶可以根據自己的工作目標和要求進行選擇，兩者都可以使用，也可以在不同的工作階段使用不同的模式。當代電子顯微鏡的重要特點在于它的多功能性，它集光學顯微鏡的形態、結構和成分分析于一體。因此，我們應該密切關注科學技術發展的新趨勢。生物顯微鏡和體視顯微鏡的使用拓寬了我們自身的科技視野，充分利用了各種新的實驗方法。

4.認真對待圖像錄制，努力獲得高質量的圖片

可以說，電子顯微鏡工作的結果幾乎都體現在獲得的圖片上。因此，在保證顯微鏡良好工作條件的前提下，電子顯微鏡工作者應高度重視圖像拍攝，包括對焦、選擇放大倍率、調整對比度和曝光等。并且還防止在拍攝期間可能遇到的機械振動和樣本漂移。生物顯微鏡和體視顯微鏡的應用作者認為，電子顯微鏡工作者應親自從事負片的研制，以保證能獲得應有的實驗結果。